દરેક નમૂનાના તાજા પાંદડાઓને પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં ત્રણ વખત કચડી નાખવામાં આવ્યા હતા, CTAB ધરાવતી નળીમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા અને પછી તૂટક તૂટક મિશ્રણ સાથે 65°C પર જળ સ્નાનમાં એક કલાક માટે ઉકાળવામાં આવ્યા હતા. ત્યારબાદ, ક્લોરોફોર્મ: આઇસો-એમિલ-આલ્કોહોલ (24:1) ઉમેરવામાં આવ્યું, હળવેથી મિશ્રિત કરવામાં આવ્યું અને 10 મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યું. પછી ડીએનએ ધરાવતા સુપરનેટન્ટના 500 માઇક્રોલિટરને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં વરસાદના બફર સાથે ભેળવીને ઠંડુ કરવામાં આવ્યું. પછી સમાવિષ્ટોને લાલ સ્તંભમાંથી પસાર કરવામાં આવ્યા હતા અને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યા હતા. બંધનકર્તા બફર સાથે ફ્લો-થ્રુ ઉમેરવામાં આવ્યું હતું અને ફરીથી વાદળી સ્તંભમાંથી પસાર થયું હતું અને એક મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ થયું હતું. વાદળી સ્તંભ ફિલ્ટરને વળગી રહેલ ડીએનએને ઇથેનોલ ધરાવતા વોશ બફર સાથે એક મિનિટ માટે બે વાર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યું હતું. જિનોમિક ડીએનએ આખરે ટ્રિસ-ઇડીટીએ બફરનો ઉપયોગ કરીને એક મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજનો ઉપયોગ કરીને દૂર કરવામાં આવ્યું હતું.
Director, ICAR-Central Arid Zone Research Institute, Near I.T.I, Jodhpur, Jodhpur-342003
0291-2788706
